血培養(yǎng)采集的知識點(diǎn)

抗生素時代，感染仍是人類健康的主要“殺手”。據(jù)統(tǒng)計(jì)，感染性疾病占世界人口死因的25%。臨床病原微生物檢測是抗菌藥物合理應(yīng)用和細(xì)菌耐藥性監(jiān)測的重要保障，其中血培養(yǎng)是診斷血流感染最直接和最可靠的方法。

血培養(yǎng)是將新鮮離體的血液標(biāo)本接種于營養(yǎng)培養(yǎng)基上，在一定溫度、濕度等條件下，使對營養(yǎng)要求較高的細(xì)菌生長繁殖并對其進(jìn)行鑒別，從而確定病原菌的一種人工培養(yǎng)法。

規(guī)范的血培養(yǎng)是血流感染診斷的金標(biāo)準(zhǔn)，陽性結(jié)果不僅可以證實(shí)感染性病原體的存在和種類，還可以通過隨后進(jìn)行的藥敏試驗(yàn)結(jié)果指導(dǎo)臨床優(yōu)化抗生素的選擇，改善患者預(yù)后。

想要獲取準(zhǔn)確的血培養(yǎng)結(jié)果，需要臨床醫(yī)生、護(hù)理人員和檢驗(yàn)科工作人員共同做好質(zhì)量控制。那么，我們該如何為血培養(yǎng)的正確采集把好關(guān)呢？

一、明確采集血培養(yǎng)的指征

1、體溫>38℃或<36℃；

2、寒戰(zhàn)；

3、外周血白細(xì)胞計(jì)數(shù)增多（計(jì)數(shù)>10.0×10⁹/L，特別有“核左移”時）或減少（計(jì)數(shù)<4.0×10⁹/L）；

4、呼吸頻率>20次/min或動脈血二氧化碳分壓（PaCO₂）<32mmHg；

5、心率>90次/min；

6、皮膚黏膜出血；

7、昏迷；

8、多器官功能障礙；

9、血壓降低；

10、炎癥反應(yīng)參數(shù)如C反應(yīng)蛋白、降鈣素原（PCT）、1，3-β-D-葡聚糖（G試驗(yàn)）升高等。

二、合適的采集時間

最佳采集時間

寒戰(zhàn)或發(fā)熱初起時采集（2小時內(nèi)采集效果最佳）；應(yīng)用抗菌藥物之前采集最佳（采集前已用藥的應(yīng)注明，并最好在停藥6~8小時后或下次用藥前采集）

正確的采集套數(shù)

需氧瓶-厭氧瓶

“一套血培養(yǎng)”指從同一穿刺點(diǎn)采集的血液標(biāo)本，通常分別注入需氧和厭氧瓶。

成人每次應(yīng)采集2~3套（以提高病原菌檢出率和判斷有無污染菌），每套從不同穿刺點(diǎn)進(jìn)行采集并標(biāo)記部位。另外，由于抗生素開始治療后，血液中的細(xì)菌并不能立即被清除，因此5天內(nèi)無需重復(fù)采集。

如懷疑感染性心內(nèi)膜炎、急性心內(nèi)膜炎應(yīng)立即采集血培養(yǎng)。宜在經(jīng)驗(yàn)用藥前30min內(nèi)不同部位采集2~3套血培養(yǎng)。亞急性心內(nèi)膜炎宜每隔0.5h~1h采集一套血培養(yǎng)，不同部位共采集3套血培養(yǎng)。如24h培養(yǎng)陰性，宜加做2套血培養(yǎng)。研究表明血流感染患者中，1套的陽性檢出率為73.2%，2套為93.3%，3套為96.9%。

兒童通常僅采集需氧瓶。有以下高危因素時應(yīng)考慮厭氧瓶培養(yǎng)：其母產(chǎn)褥期患腹膜炎，或慢性口腔炎或鼻竇炎、蜂窩組織炎、有腹腔感染的癥狀和體征、咬傷、接受類固醇治療的粒細(xì)胞缺乏患兒。

考慮肺炎鏈球菌菌血癥時，宜同時做腦脊液培養(yǎng)。

三、足夠的采集量和培養(yǎng)時間

標(biāo)本采集量

采血的總量是影響病原體檢出的重要因素之一。每瓶應(yīng)采血8~10ml，兒童患者因?yàn)檠褐胁≡鷿舛容^高，血培養(yǎng)量無需等同于成人，但也推薦采血量每瓶不少于2ml。

培養(yǎng)時間

血培養(yǎng)推薦35℃~37℃孵育7天，一些緩慢生長的苛養(yǎng)菌（如巴爾通體、李斯特菌屬、布魯菌屬和奴卡菌屬等）和雙向真菌需要更長的孵育時間。

酵母菌在需氧瓶中易生長，多數(shù)酵母菌孵育2~5天可檢出，懷疑雙相真菌或絲狀真菌感染，孵育時間需延長2~4周。由于分枝桿菌繁殖緩慢，針對其的培養(yǎng)瓶應(yīng)至少孵育6周。

四、正確的采集方法

采集靜脈血（僅在評估導(dǎo)管相關(guān)性血流感染時采集導(dǎo)管血）。血培養(yǎng)宜單獨(dú)采血，與其他檢測項(xiàng)目同時采血，應(yīng)先采血培養(yǎng)瓶，以避免污染。

采集前做好手衛(wèi)生，靜脈穿刺點(diǎn)選定后，去除血培養(yǎng)瓶的塑料瓶帽，切勿打開金屬封口環(huán)和膠塞，使用75%乙醇或70%異丙醇消毒，自然干燥60s。注意采血前檢查血培養(yǎng)瓶是否完好無損、是否過期。在穿刺前或穿刺期間，為防止靜脈滑動，應(yīng)戴無菌乳膠手套固定靜脈。

穿刺點(diǎn)皮膚消毒

1、三步法

第一步：75%酒精擦拭靜脈穿刺部位，待干30s以上；

第二步：1%~2%碘酊作用30s或1%碘伏作用60s，從穿刺點(diǎn)向外劃圈消毒，消毒區(qū)域直徑達(dá)3cm以上；

第三步：75%乙醇擦拭碘酊或碘伏消毒過的區(qū)域進(jìn)行脫碘。

對碘過敏的患者，在第一步基礎(chǔ)上再用75%乙醇消毒60s，待酒精揮發(fā)干燥后采血。

2、一步法

0.5%葡萄糖酸洗必泰作用30s（不適用于2個月以內(nèi)的新生兒），或70%異丙醇消毒后自然干燥（適用于2個月以內(nèi)的新生兒）。注意穿刺點(diǎn)消毒后不可再觸碰。

五、血培養(yǎng)采集流程

手衛(wèi)生（可手消） → 戴口罩 → 75%酒精消毒培養(yǎng)瓶的橡皮塞，待干60s → 75%酒精消毒穿刺部位，由內(nèi)向外劃圈，作用（待干）30s → 以碘酊或碘伏消毒穿刺部位（碘酊作用30s，碘伏作用1.5-2min），從穿刺點(diǎn)由內(nèi)向外劃圈，消毒范圍直徑3cm以上 → 75%酒精脫碘作用60s，待干 → 持穿刺針按常規(guī)方法刺入靜脈，另一頭刺入相應(yīng)血培養(yǎng)瓶內(nèi)。

成人采血量8-10ml/瓶，嬰幼兒1-5ml/瓶（嚴(yán)格無菌操作，不允許在皮膚消毒后用手接觸靜脈）。

血液注入血培養(yǎng)瓶后輕搖瓶身，做好標(biāo)記 → 立即送檢（切忌將培養(yǎng)瓶冷藏或冷凍）。

注意事項(xiàng)

用注射器無菌穿刺取血后，勿換針頭（如行第二次穿刺，換針頭），直接注入血培養(yǎng)瓶，不應(yīng)將抗凝血注入血培養(yǎng)瓶。

血液接種到培養(yǎng)瓶后，輕輕顛倒混勻以防血液凝固。

血培養(yǎng)瓶應(yīng)在2h之內(nèi)送至實(shí)驗(yàn)室孵育或上機(jī)；如不能及時送檢，應(yīng)將血培養(yǎng)瓶置于室溫下，切勿冷藏或冷凍。用采用密封袋和硬質(zhì)防漏的容器運(yùn)送標(biāo)本。若運(yùn)送到參考實(shí)驗(yàn)室，應(yīng)使用符合生物安全規(guī)定的包裝。

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